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2021-08-12
RNA免疫共沉淀(RNAimmunoprecipitation,RIP)是一种基于抗体的技术,用于定位体内的RNA-蛋白质相互作用。将所关注的RNA结合蛋白(RBP)与其结合的RNA一起进行免疫沉淀,鉴定结合转录RNA(mRNA、非编码RNA或病毒RNA),可以通过实时PCR、微阵列或测序检测。表观遗传学和RNA生物学领域对不同RNA作用和功能的关注大大增加。据观察,RNA的功能远不止转录和后续的翻译。例如,RNA-蛋白质相互作用能够调控mRNA和非编码RNA的功能。对RNA...2021-08-02
1、样本准备过程中防止蛋白质降解和保留翻译后修饰样本准备过程中,细胞会释放蛋白酶和/或去磷酸化酶,为了减少这些酶的活性,处理样本的过程应在冰上进行,并预先冷却所有缓冲液,并且建议用含蛋白酶和磷酸酶抑制剂的裂解缓冲液。2、磷酸化特异性抗体的选择选择磷酸化特异性抗体时,选择所要检测位点的磷酸化抗体至关重要。磷酸化都会使蛋白质的分子量增加80Da,检查抗体是否检测到磷酸化靶蛋白的分子量正确的条带也很重要。3、诱导磷酸化课题设计可能需要在收获前刺激细胞,以确保蛋白质被磷酸化。例如,在...2021-08-02
蛋白转印的方法蛋白转印可选择传统湿转、半干转或快速半干转方法。湿转系统:适用于大多数各种分子量的常规蛋白转印。转印过程中凝胶和膜被浸入充满转印缓冲液的槽中。半干转系统:凝胶和膜被夹在预先润湿缓冲液的滤纸之间,滤纸与平板电极直接接触。半干转系统的安装使用比湿转简单。快速转印系统:快速转印系统是最近发展出来的技术,使用专用设备、专用滤纸及专用缓冲液来快速有效地转印蛋白。通常滤纸和湿润的膜预先放在一次性包装中,简化了转印“三明治”的组装。转印缓冲液转印缓冲液包含强导电性化学缓冲试剂...2021-07-30
中山大学药学院于7月27日发布通报,该院2021年7月27日发生一起实验安全事故,实验=室在清理通风柜时发现之前毕业生遗留在烧瓶内的未知白色固体,一博士研究生用水冲洗时发生炸裂,炸裂产生的玻璃碎片刺破该生手臂动脉血管,送医救治伤情得到控制,无生命危险。与实验室负责老师沟通分析,导致炸裂的未知白色固体中可能含有氢化钠或氢化钙,遇水发生剧烈反应而炸裂。实验室的瓶瓶罐罐清洗是科研工作者最日常的工作,但是,如果你并不确定瓶内装的是什么东西,千万不要随意就拿去清洗!有些化学品遇水会发生...